Сельскохозяйственная биотехнология-стр.223

При использовании одноканального катетера промывная жидкость вводится несколько раз (5-8 раз) и затем вытекает из рога матки. В обоих случаях вводят 200-300 мл жидкости. В качестве промывной жидкости используют фосфатный буфер Дюльбекко, обогащенный глюкозой и бычьим сывороточным альбумином или 1%-ной эмбриональной сывороткой крови с антибиотиками. Такая же процедура повторяется и со вторым рогом матки. Промывную жидкость собирают в большие градуированные цилиндры или во флаконы из-под среды. После отстаивания в течение 30 мин верхнюю часть жидкости сливают, а жидкость на дне сосуда просматривают под стереоскопическим микроскопом с целью обнаружения эмбрионов. Обычно извлекают около 50% яйцеклеток от числа овуляций. Эмбрионы хранят до пересадки в чашках Петри в той же среде ТСМ 199 с добавлением 20%-ной эмбриональной сыворотки.

Наиболее оптимальыне сроки для извлечения эмбрионов - 6-8-й дни после начала охоты, так как ранние бластоцисты этого возраста наиболее пригодны для глубокого замораживания и могут быть с высокой эффективностью пересажены нехи рургическим способом. Корову-донора используют б-8 раз в году с извлечением по 3-6 эмбрионов.

Нехирургический метод извлечения эмбрионов разработан и у кобыл (В.Р. Аллен, Е.А. Роусон, 1975). Применяя модифицированное устройство Шуги, авторы извлекали 40-47% эмбрионов у кобыл в период между 6-м и 8-м днями после овуляции. Еще более высоких результатов (90% эмбрионов у 20 кобыл) достигли японские исследователи при использовании устройства, закрывающего шейку матки, что позволяет непрерывно промывать ее полость.

У овец и свиней нехирургическое извлечение эмбрионов невозможно ввиду трудности прохождения катетера через шейку в рога матки. Однако хирургическая операция у этих видов животных относительно проста и непродолжительна. Доступ к репродуктивному тракту осуществляется лапаротомией по белой линии живота. У свиней I-, 2- и 4-клеточные эмбрионы извлекают из яйцеводов в течение 40 ч после овуляции. При этом стеклянную канюлю вставляют в истмус через маленькое отверстие в верхушке рога матки. Через канюлю вводят 20-30 мл промывной жидкости и собирают ее из ампулярного конца яйцевода в чашку Петри. Для извлечения эмбрионов из матки промывают яйцевод и верхушку рога матки. Рог матки пережимают на равном расстоянии от верхушки и канюлю вставляют в рог матки. Обычно для вымывания используют среду Дюльбекко с лактатом, пируватом и бычьим сывороточным альбумином. Эмбрионы свиней можно извлекать до 12-го дня после начала охоты. Эффективность извлечения эмбрионов обычно высокая (около 95%). Можно делать 3-4 операции на одном животном (С. Полдж, 1982).

Другие материалы

Технология солода и пива-стр.212

2.8.2.Э. Плотность Данные о плотности дают представление о растворении эндосперма. Чем меньше плотность, тем лучше растворение зерна. Плотность оценивается следующим образом:

Плотность (кг/дм3)

Рыхлость

Ниже 1,10

Очень хорошая

1,10-1,13

Хорошая

1,14-1,18

Удовлетворительная

Выше 1,18

Плохая